源头进行内毒素去除设计，生物工艺中内毒素去除策略
内毒素是医药行业非常关注的一个指标，关系着医药产品的质量。
内毒素也叫酯多糖，是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，位于细胞壁最外层，覆盖在细胞壁的黏肽上，内毒素一般是细菌死亡溶解或人工破坏细菌细胞之后才能释放出来，其毒性成份主要为类脂A。内毒素对人体是有危害的，但是其毒性是比较弱的，可以引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。
内毒素是复杂的混合物，在整个工艺中从源头就要将内毒素去除设计进去。每一步工艺过程去除一点，更要在无菌操作环境，无热源器皿中操作。
1.内毒素的去除是系统工程，每一步都要考虑。
2.保证工艺过程的环境器皿的洁净无热源，避免交叉污染。
3.内毒素是复杂的混合物，不同来源的内毒素性质差异较大，同一来源的，不同分子之间性质差异也较大，所以内毒素去除没有通用的方法。
4.内毒素的去除通常和各种方法配合使用，如离子交换层析加纳滤，疏水层析加凝胶过滤层析等。
如重组大肠杆菌表达的胞内可溶性Lysozyme中内毒素的去除：
1）在收集细胞之后，重悬浮用的水，器皿都要无热源，破碎后，先硫酸氨盐析，盐析的样品用疏水层析介质Phenyl Focurose 6FF(HS)进行纯化，此时内毒素在高盐环境中聚集，过疏水层析时流穿，此过程可将内毒素从100万EU/ml降低到1万EU/ml；
2）经过疏水层析纯化的样品，内毒素含量仍然很高，在洁净环境中，在过离子交换层析Q Focurose 6XL，选择合适的层析条件，让蛋白流穿，内毒素和填料结合。此过程可将内毒素从1万EU/ml降低到100EU/ml。
3）经过离子交换层析的样品，在用凝胶过滤层析，用Focudex G75,缓冲液中加入200mM的NaCl，避免蛋白和内毒素结合，也可以加入2%的Triton X-100.此过程可将内毒素从100EU/ml降低到0.1EU/ml.
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